1. 课题来源与选题依据:宫颈癌是目前世界上威胁妇女健康最为严重的疾病之一,其发病率仅次于乳腺癌。
近些年来的研究表明,人乳头瘤病毒(Human Papilloma Virus,HPV) 是导致宫颈病变,特别是宫颈癌的重要因素,流行病学研究资料证实高危型HPV的持续感染是引起宫颈癌的主要原因,根据HPV致癌风险性的高低将其分为高危型和低危型,近年来宫颈癌发病率呈上升趋势,因此对HPV进行分型检测既可以帮助对不同型病例采取对应的治疗方案,而且对未来宫颈癌的靶向治疗和预防具有重大的意义。
目前对 HPV 进行分型检测主要是采用分子生物学的技术来检测病毒的DNA。
纳米金颗粒具有特殊的光学性能,在纳米金表面修饰特定的核酸序列,在一定反应条件下可以与靶标DNA进行杂交而形成明显沉淀,通过颜色的改变来检测靶标是否存在。
而核酸侵入反应能识别单个碱基的核酸差异,具有高度的特异性,与普通PCR反应偶联可实现具有高灵敏、高特异性的检测,再与纳米金技术相结合即建立起了一种高灵敏 、高特异性、且可视化的检测方法。
2. 拟研究的问题和研究手段:本课题将对HPV的21种亚型进行区分检测,外加一组内参。
采用的研究对象为临床样本中的DNA。
该方法引用了数学思维,对21种亚型分组,建立7管检测体系。
在已建立好的多重反应体系和优化后的反应条件下实现对不同亚型的区分,并将实验结果与试剂盒的结果相比较,计算并评价一致性。
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