黄芪作为一种重要的医药原料,因其市场需求量较大,市售黄芪的质量参差不齐,给黄芪药材和以黄芪为原料的中成药质量的均一性造成了很大的困扰。本课题旨在研究不同生长年限、不同采收期、不同药用部位和不同老皮程度的质量差异情况,测定其中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮苷的含量,并通过生长轮的显微鉴别,分析生长轮和生长年限之间的关系,为参芪扶正注射液的质量标准建立提供科学依据。 一、文献综述 黄芪是我国著名的传统中药,始载于《神农本草经》,称之为黄耆,来源于豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus Bge. var.mongholicus(Bge.) Hsiao和膜荚黄芪A.membranaceus (Fisch.) Bge.的干燥根[1]。因其具有良好的补中益气,托毒生肌,利尿消肿的功效而被广泛使用,现代药理作用包括增强机体免疫功能,促进抗体合成,促进新陈代谢,保肝降压,抗菌抗病毒抗肿瘤等[2] 。其化学成分众多,主要的有效成分有皂苷类、黄酮类和多糖类,还具有氨基酸类、生物碱类等其他成分[3] 。黄芪向来具有十药八芪之称,以黄芪为原料的中成药超过200多种[4] ,所以黄芪药材的需求量极大。黄芪资源来源广泛,山西、内蒙古和东北三省为主要的道地产区,四川、陕西、江苏等地亦有分布。为了满足市场的需求,种植方式也在原来的野生芪基础上增加了栽培黄芪和半野生黄芪(将种子播种在山上, 6~8年后采挖, 此栽培方式为半野生栽培) [5] 。由于市售黄芪的基源、种植方式、生长年限的多样性,药材质量参差不齐,导致以黄芪为原料的中成药和保健品质量也受到一定影响,我国学者也通过多个角度对黄芪质量的影响因素进行了研究。
1.不同生长年限的质量研究
黄芪属于多年生草本植物,不同生长年限会影响其内部次生代谢产物的积累,如黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷等有效成分。确定生长年限来确定合理的釆挖时间,不仅能够保证黄芪药材的质量,也能为药材质量研究提供科学性的依据。目前市售黄芪的生长年限主要包括四种,产自山西的半野生黄芪(生长年限基本与野生黄芪一致)、河北与山东的一年生黄芪、甘肃的两年生黄芪、内蒙古的三年生黄芪,其中以山西产的半野生黄芪的药材形状与野生黄芪最为接近[6] 。
王宗权通过HPLC-ELSD测定了3~7年生的黄芪药材中黄芪皂苷含量的动态变化曲线,四年生的黄芪皂苷Ⅰ和黄芪皂苷Ⅱ的含量高于其他年限的含量,而七年生的黄芪皂苷Ⅳ略高于其他年限,整体考虑以四年生的黄芪为佳[7] 。高四云课题组[8]以总黄酮和总皂苷为黄芪药材的指标性成分,研究对比发现2~6年生的黄芪中,绝对生长四年的总黄酮含量最高,而总皂苷含量最高的则是绝对生长三年的黄芪。张秋海等人[9]分别采用高效液相色谱法和苯酚-硫酸比色法确定不同生长年限的黄芪中黄芪甲苷和多糖的含量,结果显示1~5年间黄芪甲苷和多糖含量基本随着生长年限的增长而上升,但是三年后的含量变化不大,以质量和经济性考虑2~3年采收较好。
以上实验表明不同生长年限对黄芪内部次生代谢产物的积累有一定影响,但是由于取用的药材或部位不同使含量也存在差异,因此不同产地的药材应当建立相应的生长年限质量标准体系。
2.不同采收期的质量研究
中国药典(2015版)规定黄芪的最佳采收期为春、秋两季,与大多数根茎类采收时间一致。适时采收是保证药材高产、优质并达到药用效果的重要环节。
有研究测定了山西浑源黄芪不同采收期三种黄芪皂苷(Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ)含量的动态变化,九月下旬的黄芪皂苷Ⅰ含量较高,黄芪皂苷Ⅱ在十月中旬含量最高,黄芪皂苷Ⅳ在整个采收期间变化不明显,研究者给出建议于九月下旬采收黄芪更好[7] 。贾桂芝等[10]对比了不同采收时间的栽培黄芪中黄芪甲苷的含量,结果显示四月底(0.1125%)和十一月初(0.106%)的黄芪甲苷含量较高,即黄芪的萌动期和休眠期,最佳采收期为四月末五月初和十月末十一月初。有学者以蒙古黄芪所含多糖、黄酮、皂苷的含量来对比不同采收期的质量差异,发现9-10月采收的蒙古黄芪多糖含量为6.73%~7.79%,黄酮含量为2.88%~3.08%,皂苷含量为0.535%~0.563%,各成分均达到了较高水平[11] 。
最佳采收期的确定受地理环境和天气的影响较大,质量均一性容易受到影响,所以得到的实验结果易产生偏差,但总体结果显示秋季釆挖得到的质量较好。
3.不同药用部位的质量研究
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