课题背景:植物激素是植物体内作为执行细胞通讯的化学信息,在植物的代谢,生长,形态建成等生理活动的各个方面均起着重要的作用。传统的植物激素分为五大类激素:生长素类、赤霉素类、细胞分裂素类、乙烯和脱落酸,对植物激素的进一步研究能够帮助人们进一步了解植物激素的作用机理和植物生长调控的途径,以促进农林、园艺等领域的研究[1]。在植物生长过程中缺乏激素就会带来一系列负面的影响,其中最为显著和重要的性状就是矮化[2]。
油菜素内酯是一种新型的植物内源激素,是国际上公认为活性最高的高效、广谱、无毒的植物生长激素。它能充分激发植物的内在潜能,促进作物生长和增加产量,提高作物的耐冷性,提高作物的抗病、抗盐能力,使作物耐逆行增强。
目前,穴盘育苗已成为工厂育苗的主要方法,但是由于自然因素和工厂化育苗过程中苗量大、空间小等问题,幼苗徒长已成为工厂化育苗的瓶颈[3]。另外,植株的矮化也有利于植株的抗风、抗倒伏以及提高产量等。所以研究矮化剂在不同作物中应用的效果对实际生产有重要意义。
番茄一般株型较高,因此一般在撘架、吊蔓、施药、采收等方面有诸多不便,并且生长周期长、需要多次落蔓[4],因此对番茄的矮化对其栽培管理有重要意义。
本次研究以大豆、番茄作为材料,研究不同油菜素内酯合成阻断剂对植株的生长发育的影响,
并探究KC-1对番茄和大豆的最适浓度,为有效控制幼苗株型,抑制幼苗徒长,培育壮苗提供理论和实际依据。
实验材料:番茄(苏粉八号),大豆(苏豆5号)
实验方法:
- 选种:选取饱满,大小均匀无损伤的番茄和大豆种子。
- 消毒:带菌的种子播种后可能将病菌传给幼苗或植株使其发病,所以育苗前也要进行消毒处理。将番茄种子用10%的次氯酸钠消毒15分钟[5],大豆种子用0.5%的次氯酸钠消毒30分钟[6]。
- 催芽:将消毒完的番茄处于黑暗条件下浸泡24小时,大豆种子浸泡8小时,浸泡完的种子放在铺有滤纸的培养皿中培养,将每种种子随机分为A、B两组,A组加入1/2的Hoagland培养液,将B组宰随机分为7组,除了添加1/2的Hoagland培养液,B1,B2,B3分别加入0.1,1,2umol/L的KC-1试剂,B4,B5分别加入0.1,1umol/L的youcaizol试剂,B6加入l/L的propiconazole[7],B7加入1umol/L的brassinazole[8],番茄种子和大豆种子分别置于28℃和25℃的恒温培养箱中。
- 将露白的种子置于计数板中并添加1/2的Hoagland培养液进行水培,并按分组做好标记。大豆种子光照12h黑暗12h[9][10]。
- 待大豆和番茄幼苗水培到长出第一片叶子后将A组宰随机分为8组,除了添加1/2的Hoagland培养液,A1,A2,A3分别加入0.1,1,2umol/L的KC-1试剂,A4,A5分别加入0.1,1umol/L的youcaizol试剂,A6加入1umol/L的propiconazole试剂,A7加入1umol/L的brassinazole试剂,A8加入等量的DMSO试剂。
- 水培到幼苗的叶子颜色与对照组相差明显即可进行数据测量。
- 测定项目:株高:用直尺测量根系顶端到植株顶端的距离。
叶绿素含量:(1)依次从标记的植株中采集新鲜叶片并去除粗大的叶脉 ,剪碎;(2)称量剪碎的叶片0.5g, 共2 份, 分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及 5 ml的丙酮,研磨成匀浆后, 用 5 ml的移液管取 5 ml80%的丙酮溶液与研钵中 ,继续研磨 ,然后将匀浆转入 10 ml离心管,再用适量的 80 %的丙酮溶液洗涤研钵, 并将其一同转入离心管中 ; (3)将离心管配平后放入离心机中 ,离心; (4)离心后 ,弃沉淀,取上清液 ,用 80%的丙酮定容至20 ml; (5)用 1 ml的移液管取上述色素提取液1 ml ,加 4 ml 80%的丙酮稀释后, 转入比色皿中 ,以 80%的丙酮作对照 ,测定 663、665 nm 处的光密度值,记录数据; (6)根据公式计算出提取液中叶绿素 a、叶绿素 b 的浓度 ,再根据稀释倍数分别计算每克鲜重叶中叶绿素的含量: Ca =12.7OD663 -2.69OD 645 ; Cb = 22. 9OD 645 -4.68OD 663 ;Cr = Ca Cb = 8.02OD 663 20.21OD 645 [11]。
生物量:电子天平测定鲜重,80℃恒温24h后测定干重。
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