开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
地塞米松诱导原代肝细胞胰岛素抵抗与5-HT系统的相关性研究
----开题报告
1. 前言
胰岛素抵抗是指正常水平的胰岛素调节机体对葡萄糖的摄取和利用的效率下降,糖代谢紊乱的慢性病理过程,对此机体代偿性的分泌过多胰岛素产生高胰岛素血症,以维持血糖的稳定。胰岛素抵抗易导致代谢综合征和2型糖尿病[1][2]。但是在体研究药物或其他化学物质在肝脏细胞内的代谢机制存在一定的困难,所以可以通过体外培养肝脏细胞的方法进行肝细胞分子生物学特征的研究[3]。同时初步进行地塞米松诱导原代肝细胞胰岛素抵抗与5-HT系统的相关性研究。
2. 正文
目的:
Seglen两步灌流法是经典的原代肝细胞分离方法,此法分离培养的肝细胞数量多,纯度高,形态好,而且保留了肝细胞的功能。本实验采用seglen的原位两步灌流法分离培养肝细胞[4]。 在体外建立胰岛素抵抗细胞模型,并用于大鼠原代肝细胞胰岛素抵抗与5-HT系统的相关性研究[1]。
方法:
Seglen两步灌流法是经典的原代肝细胞分离方法,此法分离培养的肝细胞数量多,纯度高,形态好,而且保留了肝细胞的功能。本实验采用seglen的原位两步灌流法分离培养肝细胞。然后使用地塞米松长期作用于3T3-L1脂肪细胞,产生胰岛素抵抗[5]。
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