高表达RFP荧光蛋白的HCT116细胞的构建及筛选文献综述

 2023-01-02 06:01

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

一．拟研究的问题

CAR-T细胞治疗是当前的研究热点，在进行CAR-T体内外实验时，需要对肿瘤细胞进行处理，便于观察与追踪。由于慢病毒成品价格特别高，尝试自主包装慢病毒以降低实验成本。本课题中使用的慢病毒过表达载体为携带MSLN基因与RFP基因的质粒。稳转细胞系筛选成功后，肿瘤细胞能高表达MSLN与RFP，为后续CAR-T治疗提供细胞基础。

二．实验目的

本研究旨在构建高表达RFP蛋白的人结直肠癌细胞HCT116细胞的构建，并进行稳转细胞系的筛选。通过培养肿瘤细胞，制定抗生素杀灭曲线，慢病毒感染，极限稀释法筛选稳转细胞系，为后续CAR-T细胞体外及体内实验做准备。

三．实验方法

本实验的研究包括以下几项内容：

1 抽提质粒

2 自主包装慢病毒

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