羟胺衍生化HPLC法文献综述

 2023-01-28 11:01

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

伏立诺他是一组蛋白脱乙酰酶（HDAC）抑制剂。能通过诱导细胞分化、阻断细胞周期、诱导细胞调控而发挥作用。治疗加重、持续和复发或用两种全身性药物治疗后无效的皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL，一种非霍奇金淋巴瘤）。CTCL是一种影响皮肤的白血细胞类型的T细胞癌。体外研究表明，伏立诺他在纳摩尔级浓度（IC 50lt;86nmolgt;）即可抑制HDAC 1、HDAC 2和HDAC 3（Ⅰ型）以及HDAC 6（Ⅱ型）酶活性。在某些癌细胞内，抑制过量的HDAC酶可激活正常细胞活性的基因。伏立诺他降低HDAC活性有助于减缓或中止癌细胞生长的基因激活。

本品粗品中含有少量的羟胺。羟胺具有致突变性，应按照遗传毒性杂质进行限度设定。羟胺无紫外吸收基团， 而高效液相色谱仪在我国已很普及， 常配置紫外检测器，但无法分析没有紫外吸收的样品。 有关羟胺的柱前衍生化 HPLC 含量测定方法， 国内尚未见报道 为此， 本实验通过氯甲酸 － 9 －芴甲酯( FMOC － Cl) 柱前衍生化 HPLC 法， 采用化学衍生技术接入强紫外吸收基团， 转化成强紫外衍生物， 选用较为广泛的紫外检测器， 以此建立羟胺的含量测定方法，操作方便准确，方法灵敏，具有很大的实用价值。

二．方法选择：

1. 盐酸羟胺的分析方法有滴定法、 电化学法、 分光光度法等。

2.经查文献分别采用Fe(Ⅲ) -磺基水杨酸体系间接分光光度法测定盐酸羟胺和而催化光度法法和荷移反应测定盐酸羟胺测定羟胺的含量, 但是，在实际检验工作中，发现测定时有含量测定结果偏低，或滴定突跃不明显造成无法准确指示滴定终点的现象。因此实验结果的重现性很低，因此改进方法问题结果均不理想。

3．我们建立了FMOC-Cl衍生化HPLC法，进行方法学验证并测定本品中的羟胺残留。采用高效液相色谱法,对原料药进行有关物质的分离检查，并建立了含量测定的方法。本方法准确、简便、专属性强、重复性好,可用于含量测定和有关物质检查。

三．条件确定

1. 溶液的配备：包括衍生化溶液，供试品溶液，对照品溶液，空白溶液

2. 衍生化反应：衍生反应的PH，反应时间，衍生化试剂与样品的质量比，不同色谱柱与液相色谱仪的确定。

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