开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
1.研究目的
探讨蛋白E2F-1 在GL-V9诱导细胞凋亡过程中的调节作用,阐明其影响蛋白E2F-1的因素,为其进一步开发找寻新的靶点提供实验支持。
2.研究拟解决的问题
研究蛋白E2F-1表达对GL-V9诱导细胞凋亡的影响,以及明确Gl-V9引起其表达变化的诱导因素。
3.研究内容
1)在GL-V9诱导细胞凋亡中,E2F-1的作用及对p73激活的凋亡通路的影响
给予正常肝癌细胞,适量的GL-V9预孵育不同时间,利用细胞流式技术和westernblot 技术,检测细胞凋亡情况;p73和E2F-1在蛋白水平的表达变化;同时,检测与其相关的凋亡通路激活,如凋亡相关的蛋白等,明确E2F-1对细胞凋亡的调节影响。
2) 在GL-V9诱导细胞凋亡中,ROS、ER应激对E2F-1和p73表达的影响
分别利用ROS抑制剂和ER应激的抑制剂,考察细胞凋亡情况及E2F-1、p73表达的变化,明确ROS和ER应激对E2F-1和p73的调控作用,探求影响E2F-1和p73蛋白的因素。
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