一、研究内容Agacutase(蛇毒类凝血酶)的分离纯化拟研究或解决的问题建立有关分离和纯化的分析方法用建立的方法测定本品的纯度采用的研究手段利用HPLC凝胶柱进行分离样品，将样品浓度配置成1.0mg/ml，0.2M PBS 作为流动相，流速控制为1.0ml/min，柱温控制在25℃，pH调节到6.8，进样量为20mu;l，检测波长为280nm，理论塔板数按主峰计算应不低于1000。
利用HPLC的C4反相柱对样品进一步分离分析，用1%三氟乙酸水溶液（内含0.1%正丁胺）将酶溶解为1mu;g/mu;l上样， 乙腈（内含1%三氟乙酸和0.1%正丁胺）作为流动相进行梯度洗脱：0min/40%到10min/64%到10.1min/64%到15min/40%(乙腈浓度) ， 流速控制为1.0ml/min ，检测波长为280nm。
3、纯度检测：（1）取本品适量，加水制成1mg/ml作为供试品溶液，利用SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法（用12%分离胶、5%积层胶，电压控制在120V， 上样量分别为20、40、60g，分别是国家标准上样量的1、2、3倍从而跑1h的电泳）进行检查。
（2）利用高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录）测定。
色谱条件与系统适用性试验用凝胶为填充剂：以含0.05%叠氮化钠（NaN3）的0.2M磷酸盐缓冲液[取磷酸氢二钠（Na2HPO312H2O）35.08g与磷酸二氢钠（Na2HPO312H2O）15.91g，溶解于900ml水中，调节PH值至6.8，加水至1000ml]为流动相；检测波长为280nm。
四、文献综述类凝血酶的若干研究进展毒蛇可分为三大科：眼镜蛇科、海蛇科、蝰蛇科(包括蝰亚科和腹亚科)。
它们用于自卫和摄食的武器就是蛇毒。
蛇毒的成分十分复杂，主要是多肽和蛋白酶等毒性蛋白，其中包括12～18种蛋白质，10～15种酶和多种毒素。
蛋白质和多肽大约占蛇毒干重的95％，蛇毒中还含有金属阳离子、碳水化合物、核苷、生物胺和很少量的自由氨基酸。
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