一、研究意义基于血管平滑肌细胞(vsMCs)大量增生是导致动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进而引发一系列疾病如冠心病、心肌梗死等的重要因紊,因此,对VSMC增生调控的研究己成为As发病机制和防治研究的一个重要方面冈,这将为肝素寡糖开发成为抗动脉粥样硬化的药物提供实验依据。
许多生长因子，如血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血小板源性生长因子（PDGF）、胰岛素样生长因子-I（IGF-I）以及一些物理、化学因素能够促进VSMCs 增殖。
其中VEGF 是目前所知的作用最强的一种促血管生长因子，主要是与细胞上的受体结合，作用于内皮细胞的有丝分裂原，特异性刺激血管内皮细胞和VSMCs 增殖并调节细胞生长，对正常血管生成起重要作用。
肝素寡糖由普通肝素经过酶法、化学法等解聚得到低分子量肝素后,经分离纯化而得。
不同聚合度(degree of polymerization,dp)的肝素寡糖能和不同蛋白因子作用呈现不同生物学活性。
据文献报道,一定分子量范围的肝素寡糖具有较强的抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)的增生的活性,而VSMCs的大量增殖是导致动脉粥样硬化(ath-erosclerosis,AS)进而引发一系列心脑血管疾病如冠心病、心肌梗死等疾病的重要因素,因此对VSMCs增殖调控的研究成为AS发病机理的防治研究的一个重要方面。
二、拟研究的问题测定肝素寡糖对内皮细胞分泌VEGF和bFGF水平的影响三、采用的研究手段（一）、Cell-based ELISA法测定蛋白表达或磷酸化的变化Cell-based ELISA法测定蛋白表达或磷酸化的变化将生长近融合的HUVEC以104 细胞/孔的密度接种于96 孔培养板。
培养24 h 待细胞贴壁后，加入新的含0.5%血清的DMEM 培养液孵育12 h。
然后除control 组加入相应量的PBS 外，在10% NCS 作用后不同时间（2、4、8、16、24 h）弃培养液，进行Cell-based ELISA 检测。
4%多聚甲醛室温固定细胞20 min 。
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