全脑图像半自动区域划分及基底外侧杏仁核上游脑区细胞计数的方法文献综述

 2022-12-28 11:12

全脑图像半自动区域划分及基底外侧杏仁核上游脑区细胞计数的方法

通过对小鼠大脑中的BLA核团注入CTB染料逆向追踪投射到BLA的传出神经，探明能对BLA投射的皮层和核团，并比较这些投射的强弱，最后分析出BLA对不同感觉信息接收整合的作用。

研究内容：

基底外侧杏仁核（BLA）是哺乳动物大脑中负责情绪加工与编码的重要核团，它接受来自皮层的感觉输入，并进一步加工处理，把信息传递至下游核团，从而引发对应的情绪与行为。目前研究表明，BLA可以从梨状皮层（PIR）、岛叶和顶叶嗅皮层（PaRh）等不同感觉皮层和臂旁核（PB）等核团接收不同的感觉信息，并能促进不同皮层传入的感觉信息在杏仁核内的融合。本课题通过CTB染料逆向追踪投射到BLA的传出神经，在宽场成像之后进行不同脑区的细胞计数，从而探明能对BLA进行投射的皮层和核团，以及比较各个皮层和核团对BLA的投射的强弱。

研究手段：

一、利用CTB染料标记BLA上游通路

CTB染料保存在4℃冰箱中。将小鼠麻醉后，把CTB染料注入小鼠脑中BLA区域，小鼠饲养一周（定时给水给粮，维持昼夜节律）。

二、将鼠脑切片并染色

小鼠心脏灌流(其中生理盐水3分钟，多聚甲醛5分钟)，取脑组织后利用3%蔗糖溶液脱水。再利用O.C.T冷冻，用切片机切片，每片50um，切片完成后保存在PBS溶液中；用DAPI染色5小时，在所有脑片每三片取一片平铺在载玻片上，最后盖上盖玻片，并用指甲油封片。完成之后将玻片放在-20℃冰箱内保存。

三、宽场成像

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