极端环境来源放线菌次级代谢产物研究文献综述

 2022-12-29 07:12

一 研究目标及研究内容

1. 研究目标

沙漠、红树林等特境来源放线菌次级代谢产物研究，发现具有潜在应用价值的抗感染抗生素。

2. 研究内容

(1)对前期初筛的阳性菌株进行活化，并进行抗绿脓、金黄色葡萄球菌等致病微生物活性复筛。

（2）对复筛的抗耐药菌阳性菌株进行培养基优化，选定发酵培养基。

（3）对阳性菌株的次级代谢产物开展HPLC bioactivity profiling/microtiter plate技术的峰-孔锁定，对活性峰的UV、MS数据进行数据库检索排重，确定可能的新抗生素峰，并放大培养，获得足量的化合物进行结构解析和活性评价。

二 研究手段

(1)菌株复筛：将菌株从斜面培养基转接于ISP2液体发酵培养基上，28℃，200rpm摇床旋转培养，对发酵液和提取浓缩物进行活性复筛。提取浓缩物获得的方法为：发酵液离心获得上清液，再乙酸乙酯等体积萃取；菌丝丙酮浸泡，离心弃去沉淀；将有机相，离心浓缩，编号后，低温保存；活性筛选方法为实验室已建立的针对耐药菌的琼脂平板及96-微孔板活性筛选方法。

(2)发酵培养基优化：应用OSMAC策略，设计多种培养基，对复筛的抗耐药菌阳性菌株进行培养基优化，选定发酵培养基。

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