一、 课题解决的问题 目前猴头菇多采用人工栽培的猴头菌子实体加工成各种药物和保健食品。
但由于固体栽培生长周期长、产量低, 故有必要采取液体发酵。
本实验通过采用单因素试验对猴头菇液体菌种发酵的碳源、氮源、和其它因素进行了优化,在此基础上,进行L9( 33 ) 正交实验。
选出较适合猴头菇菌种液体培养的培养基配方,参考的指标包括菌丝干重和多糖的含量。
液体培养基和固体培养相比具有很多优越性,生产周期短、菌龄一致、菌种生产成本低、接种简便、扩建容易,更加适合于工厂化大生产,具有有推广应用的价值。
二、研究方法和技术路线实验材料仪器1.试剂材料培养基:葡萄糖,麦芽糖,蔗糖,可溶性淀粉,酵母膏,蛋白胨,玉米粉,豆饼粉,KH2 PO4MgSO47H2 O含量测定:蒸馏水,无水乙醇,丙酮,98%硫酸,蒽酮。
2.仪器恒温箱摇床,电子天平,离心机,烘箱,超声仪,紫外可见分光光度计,接种环,圆底烧瓶(250ml),量筒(100ml、5ml),漏斗,滤纸,容量瓶,移液管,滴管,具塞试管。
实验方案1试验方法液体菌种的制备取5块0. 5 cm2 新鲜斜面菌种接种于种子培养基( 50mL/ 250mL 三角瓶) 中, 在25 下150 r/ min 摇床培养3 d, 取10%( v/v) 种子液移入装50mL 发酵培养基的250mL 三角瓶中, 25摄氏度下150r/ min 培养7 d。
并测定指标,称量干重,测定多糖含量.2最适培养基的正交实验设计2.1不同碳源对猴头菇生长的影响表1:不同碳源培养基培养基配方菌丝干重 多糖 葡萄糖3%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%,MgSO47H2 O 0. 06%麦芽糖3%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%,MgSO47H2 O 0. 06%可溶性淀粉3%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%,MgSO47H2 O 0. 06%蔗糖3%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%,MgSO47H2 O 0. 06%2.2不同氮源对猴头菇生长的影响表2:不同氮源培养基培养基配方菌丝干重 多糖葡萄糖3%可溶性淀粉2%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%葡萄糖3%可溶性淀粉2%玉米粉1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%葡萄糖3%可溶性淀粉2%蛋白胨1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%葡萄糖3%可溶性淀粉2%豆饼粉1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%2.3碳氮比例对猴头菇生长的影响表3:不同的碳氮比例培养基培养基配方菌丝干重 多糖葡萄糖2%可溶性淀粉2%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%葡萄糖2.5%可溶性淀粉2%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%葡萄糖3%可溶性淀粉2%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%葡萄糖3.5%可溶性淀粉2%酵母膏1% ,KH2 PO40. 1%, MgSO47H2 O 0. 06%2.4碳源氮源正交实验水平葡萄糖 酵母膏 可溶性淀粉12% 0.5%1.5#4% 1.5%2.5%正交表实验组葡萄糖 酵母膏 可溶性淀粉 干重多糖含量一 111二 122三 133四 212五 223六 231七 313八 321九 332K1K2K3极差R菌丝干重的测量 采用细胞干重法: 取50 mL培养液, 3 000 r/ min 离心20 min, 收集菌丝球, 并用蒸馏水洗涤3 次, 将菌丝体置于80 下烘至衡重, 称量。
猴头菇发酵液的多糖测定1提取。
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