开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
反柄紫芝的化学成分研究
灵芝隶属于真菌界(Kingdom Fungi),担子菌门(Basidiomycota),担子菌纲(asidiomycetes),非褶菌目(Aphyllohorales),灵芝菌科(Ganodermataceae),灵芝属(Ganoderma)真菌赤芝和紫芝的总称[1]。灵芝是我国著名的高等药用真菌。作为药物已有2000多年的历史,早在我国东汉时期的《神农本草经》中已有灵芝记载。在明朝李时珍的《本草纲目》中对灵芝的记载为:其性味苦,平,无毒;益心气,入心充血,助心充脉,安神,益肺气,补中,增智慧,好颜色,利关节,坚筋骨,祛痰,健胃,活血。
灵芝主要分布在中国、朝鲜半岛和日本。国内分布的灵芝有二十多种,包括赤芝、紫芝、黄芝、薄盖灵芝等,多分布于云、贵、冀、吉、苏、浙、闽等省。由于野生灵芝生长分散、采集困难等原因,到目前为止,国内外研究过的灵芝属真菌仅有赤芝(G. lucidum)、紫芝(G. sinense)、树舌灵芝(G. applanatum)、南方灵芝(G. austrole)等。而反柄紫芝(Ganoderma cochlear (Bl. et Nees) Bres. )为层菌纲非褶菌目灵芝科灵芝属真菌。从形态学上看,反柄紫芝的颜色和外形同紫芝相似,但柄是背生的,因此又称作背柄紫灵芝。反柄紫芝民间用于安神、改善睡眠、增强记忆力及延年益寿。而其化学成分的研究则少见报道。
灵芝的化学成分复杂,目前已知含有多糖类、三萜类、核苷类、生物碱、氨基酸及微量元素等。灵芝的化学成分中,灵芝三萜是主要的活性成分之一。由于灵芝三萜化合物结构的多样性,已经成为当前灵芝化学成分研究的一个重要的方向。到目前为止,已经从灵芝中分离得到近200个三萜类化合物。但是不同种的灵芝分离得到的三萜种类不尽相同,成分决定活性,不同三萜类型表现出不同的生物活性。
灵芝三萜依据官能团和不同侧链,主要可以分为5个基本骨架[1]
表1. 1982-2010年间从赤芝中分离到的三萜类成分
年份 |
部位 |
三萜成分 |
结构类型 |
Ref. |
1982 |
子实体 |
Ganoderic acid A, Ganoderic acid B |
8-ene-23-oxolanosta -26-oic acid |
[3] |
1983 |
子实体 |
Ganoderic acid U-W, Ganoderic acid Z ; Ganoderic acid T |
8,24-dienlasta-26-oic acid |
[4] |
Ganoderic acid X; Ganoderic acid Y |
7,9(11),24-trienlasta-26-oic acid |
[5] |
||
1984 |
子实体 |
Ganoderic acid C |
23-oxolanosta-8-ene-26-oic acid |
[6] |
Lucideric acid A-C |
8-ene-trinorlanostane triterpenoid |
|||
1985 |
子实体 |
Ganoderic acid G; Ganoderic acid I; Ganolucdic acid A, B |
8-ene-23-oxolanosta-26-oic acid |
[7] |
Methyl lucidenate D, E, F |
8-ene-23-oxolanosta-26-oic ester |
[8] |
||
Ganodeate D, E, F, H |
8-ene-trinorlanostane triterpenoid |
[9] |
||
Ganoderenic acid A, B, C, E |
8,20(22)-dien-23-oxolanosta-26-oicacid |
|||
Ganoderic acid D, F, G |
8-ene-23-oxolanosta-26-oic acid |
|||
Lucidenic acid D |
8-ene-12-acetoxy-trinorlanostane triterpenoid |
|||
1986 |
子实体 |
Ganodermenonol; Ganodermadiol; Ganodermatriol |
7,9(11),24-tetraen-lanosta-26,27-diol |
[10] |
Ganoderic acid E, F |
8-ene-23-oxolanosta-26-oic acid |
[11] |
||
Ganoderic acid T, R, S1, S3 |
7,9(11),24-tetraen-lanosta-26-oic acid |
[12] |
||
Ganoderiol A, B |
7,9(11)-trien-lanosta-26-ol |
[13] |
||
1987 |
子实体 |
Ganoderic acid P, Q |
7,9(11),24-tetraen-lanosta-26-oic acid |
[14] |
Ganoderic acid Ma-Md; Ganoderic acid Mg-Mj |
8,24-dien-lanosta-26-oic acid |
15,16] |
||
Ganoderic acid Me, Mf; Ganodermic acid R, S |
7,9(11),24-tetraen-lanosta-26-oic acid |
[15,17] |
||
1988 |
子实体 |
Ganodermic acid T-N, T-O, T-Q |
7,9(11),24-tetraen-lanosta-26-oic acid |
[18] |
Ganoderiol G, H, I |
8,24-dien-lanosta-26-ol |
[19] |
||
1991 |
子实体 |
Ganosporeric acid A; Ganosporelactone A, B |
8-en-12-23-dioxolanosta-26-oic acid |
[20,21] |
1993 |
子实体 |
Ganodermanomtriol |
7,9(11)-dien-12,24,26-triol |
[22] |
1995 |
子实体 |
Ganolactone A |
8-ene-20,24-lactone |
[23] |
Ganoderic acid DM |
8,24-dien-lanosta-26-oic acid |
[24] |
||
2000 |
子实体 |
26,27-dihydroxy-5alpha;-lanosta-7,9(11),24-triene-3,22-dione |
7,9(11),24-trien-22-oxolanosta-26-ol |
[25] |
26-hydroxy-5alpha;-lanosta-7,9(11),24-triene-3,22-dione |
||||
2001 |
子实体 |
Lucidenic acid N |
8-ene-lanosta-trinorlanostane triterpenoid |
[26] |
2003 |
子实体 |
Lucidenic acid P; Methyl lucidenate P, Q |
8-ene-lanosta-trinorlanostane triterpenoid |
[27] |
2006 |
子实体 |
Methyl ganoderate D |
lanost-8-en-26-oate |
[28] |
Methyl lucidenate D |
lanost-8-en-24-oate |
|||
2010 |
子实体 |
Ganoderic acid Df |
8-en-23-oxolanosta-26-oic acid |
[29] |
而反柄紫芝中目前发现的两个新型三萜类化合物结构如下[2]:
本实验将在此研究基础上进一步对反柄灵芝子实体中的化学成分,主要是三萜和酚酸类化合物进行分离、提纯,对其生理活性成分做活性筛选及分析工作,找到其药理作用的物质基础
应用正相硅胶层析、反相硅胶层析、凝胶层析、制备薄层、高效液相、串联色谱等方法,从灵芝子实体中分离化合物,并通过紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振、旋光光谱、X-ray衍射结合化学方法确定化合物的结构。
对灵芝子实体的粗提物、活性部位、单体化合物,通过各种成熟的细胞筛选平台、动物模型对其药理活性进行评价。
本实验,拟用正相硅胶层析、反相硅胶层析、凝胶层析、制备薄层、高效液相、串联色谱等方法,从反柄紫芝中分离化合物,并通过紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振等方法并结合化学方法确定化合物的结构。
并拟对反柄灵芝的粗提物、活性部位、单体化合物,通过各种成熟的细胞筛选平台、动物模型对其药理活性进行评价。
方法线路图:
本实验组的指导教师邱明华研究员自2004年开始长期从事灵芝化学成分的分离、鉴定工作,取得较好成绩,尤其是2009年从紫芝中分离到灵芝三萜的新骨架,为后人提供很好的经验;且负责实验的彭惺蓉博士,在其硕士期间已经对无柄灵芝(G. resinaceum)和反柄紫芝(G. cochlear)的化学成分进行了系统研究,从中分离鉴定了42个化合物,对灵芝三萜和酚酸类成分有了充分了解,形成了一套成熟的分离三萜和酚酸类成分的方法,可以避免旧化合物的重复分离,也可以避免小量成分的损失。
本实验室除了具备分离的一般材料,如硅胶、凝胶、大孔吸附树脂等,还配备了安捷伦和Waters高效液相色谱仪,以及适合大量分离的串联色谱仪,这些为灵芝化学成分的分离提供了过硬的硬件设施。
参考文献:
[1] 陈若芸, 于德泉. 灵芝三萜化学成分研究进展[J]. 药学学,报, 1990, 25(12): 940-953.
[3] Kutoba, T., Asaka, Y., Miura, I. Antitumor effects of triterpene acids extracted from Ganoderma lucidum [J]. Helv. Chin. Acta, 1982, 65(2): 611-619.
[4] Toth, J., Luu, B., Beck, J. P., Ourisson, G., Nutritional studies on submerged culture of Ganoderma lucidum [J]. J. Chem. Res., Synopses, 1983, 12, 299.
[5] Toth, J., Luu, B., Beck, J. P., Ourisson, G. Ganoderic acid T and Z: cytotoxic triterpenes from Ganoderma lucidum (Polyporaceae) [J]. Tetrahedron Lett., 1983, 24(10): 1081-1084.
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[7]Kikuchi, T., Matsuda, S., Murai, Y., Ogita, Z., Ganoderic acid G and I and ganoderic acid A and B, new triterpenoids from Ganoderma lucidum [J]. Chem. Pharm. Bull., 1985, 33(6): 2628-2631.
[8]Kikuchi, T., Matsuda, S., Murai, Y., Ogita, Z., Ganoderic acid D, E, F and H and lucidenic acid D, E and F, new triterpenods from Ganoderma lucidum [J]. Chem. Pharm. Bull., 1985, 33(6): 2624-2627.
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[12]Hirotani, M., Ino, C., Furuya, T., Shiro, M., New triterpenods from the cultured mycelia of Ganoderma lucidum [J]. Chem. Pharm. Bull., 1986, 34(5): 2282-2285.
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[14]Hirotani, M., Asaka, I., Ino, C., Furuya, T., Shiro, M., Ganoderic aicd derivatives and ergosta-4,7,22-triene-3,6-dione from Ganoderma lucidum [J]. Phytochemistry, 1987, 26(10): 2797-2803.
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[16]Nishitoba, T., Sato, H., Sakamura, S., Novel mycelial components, ganoderic acid Mg, Mh, Mj and Mk, from the fungus Ganoderma lucidum [J]. Agric. Biol. Chem., 1987, 51(4): 1149-1153.
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[28]Hao, R. X., Zhang, J. S., Tang, Q. J., Hu, L. H., Zheng, Z. P., Pan, Y. J., Isolation, purification and identification of two new triterpenoid constituents from the fruiting bodies of Ganoderma lucidum [J]. Mycosystem, 2006, 25(4): 599-602.
[29]Fatmawati, S., Shimizu, K., Kondo, R.o. Ganoderic acid Df, a new triterpenoid with aldose reductase inhibitory activity from the fruiting body of Ganoderma lucidum [J]. Fitoterapia, 2010, 81(8): 1033-1036.
开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
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灵芝隶属于真菌界(Kingdom Fungi),担子菌门(Basidiomycota),担子菌纲(asidiomycetes),非褶菌目(Aphyllohorales),灵芝菌科(Ganodermataceae),灵芝属(Ganoderma)真菌赤芝和紫芝的总称[1]。灵芝是我国著名的高等药用真菌。作为药物已有2000多年的历史,早在我国东汉时期的《神农本草经》中已有灵芝记载。在明朝李时珍的《本草纲目》中对灵芝的记载为:其性味苦,平,无毒;益心气,入心充血,助心充脉,安神,益肺气,补中,增智慧,好颜色,利关节,坚筋骨,祛痰,健胃,活血。
灵芝主要分布在中国、朝鲜半岛和日本。国内分布的灵芝有二十多种,包括赤芝、紫芝、黄芝、薄盖灵芝等,多分布于云、贵、冀、吉、苏、浙、闽等省。由于野生灵芝生长分散、采集困难等原因,到目前为止,国内外研究过的灵芝属真菌仅有赤芝(G. lucidum)、紫芝(G. sinense)、树舌灵芝(G. applanatum)、南方灵芝(G. austrole)等。而反柄紫芝(Ganoderma cochlear (Bl. et Nees) Bres. )为层菌纲非褶菌目灵芝科灵芝属真菌。从形态学上看,反柄紫芝的颜色和外形同紫芝相似,但柄是背生的,因此又称作背柄紫灵芝。反柄紫芝民间用于安神、改善睡眠、增强记忆力及延年益寿。而其化学成分的研究则少见报道。
灵芝的化学成分复杂,目前已知含有多糖类、三萜类、核苷类、生物碱、氨基酸及微量元素等。灵芝的化学成分中,灵芝三萜是主要的活性成分之一。由于灵芝三萜化合物结构的多样性,已经成为当前灵芝化学成分研究的一个重要的方向。到目前为止,已经从灵芝中分离得到近200个三萜类化合物。但是不同种的灵芝分离得到的三萜种类不尽相同,成分决定活性,不同三萜类型表现出不同的生物活性。
灵芝三萜依据官能团和不同侧链,主要可以分为5个基本骨架[1]
表1. 1982-2010年间从赤芝中分离到的三萜类成分
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