一、拟研究或解决的问题植物体内的黄酮糖苷类化合物一般由糖基转移酶(GTs)催化形成,糖基转移酶具有良好的区域选择性和立体选择性,可利用生物催化技术进行糖苷类化合物的合成转化,在植物的生长发育过程中有至关重要的作用。
但植物中发现的糖基转移酶数量有限,本课题以鸢尾科植物射干为研究对象,研究射干黄酮类相关糖基转移酶基因并进行克隆和功能验证,以便促进天然黄酮化合物的糖基化修饰研究以及补充糖基转移酶的空缺,为进一步研究鸢尾科植物以及糖基转移酶的生化功能做出贡献。
二、采用研究手段(1)GTs基因克隆:从鸢尾科植物射干中提取其总RNA,而后逆转录成cDNA,用构建的基因特异性引物扩增得到GTs基因;(2)将提取的GTs基因与Pet28a载体连接构建质粒表达载体,并转入大肠杆菌感受态细胞中进行蛋白表达;(3)提取大肠杆菌中的蛋白质,进行体外酶促反应,反应产物经过高效液相分析,鉴定蛋白活性和功能。
三、工作安排和进度2021年1月6日-1月17日 查阅文献,确定选题。
2021年1月18日-3月20日整理文献材料,完成开题报告。
2021年3月21日-4月30日开展试验研究,获取实验数据。
2021年5月1日-5月20日 整理实验数据,完成毕业论文初稿。
2021年5月21日-5月28日修改毕业论文初稿,完成毕业论文定稿。
2021年5月29日-6月10日进行毕业论文评审,完成毕业答辩。
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