一、课题背景
甾体激素作为一类典型的环境中的内分泌干扰物,其生理功能几乎影响了脊椎动物的性别分化、生长和发育的所有方面。环境中存在的类固醇激素对生态的影响更为显著,展现出更强的内分泌干扰作用,甚至在极低的环境浓度下就可能产生干扰效应,从而对生物体造成危害,如雌性化、发育缺陷和生殖能力下降等,甚至可能最终导致种群的灭绝。随着对各种内分泌干扰物毒理学研究的不断深入,环境中类固醇激素化合物已经引起了世界各国,尤其是欧美和日本等发达国家和国际组织的广泛关注。
甾体激素根据其结构特点可分为五类:雌激素、雄激素、孕激素、糖皮质激素和盐皮质激素,它们的母核为环戊烷-多氢菲,又称甾烷,来源于胆固醇。胆固醇侧链的部分去除产生21碳孕激素和皮质激素。侧链的完全去除产生19碳的产物,称为雄激素。通过芳构化对C-19甲基的去除产生18碳化合物,称为雌激素。
二、拟解决的问题
甾体激素种类繁多,结构相似,而且多以ng/L甚至pg/L级的较低浓度存在,急需建立特异性强,灵敏度高的分析方法;且不同水体中的干扰物质不同,必须采取适当的前处理富集手段,尽可能降低样品基质中杂质干扰,同时高倍富集痕量的甾体激素,保证后续分析的灵敏度和精确度。
三、研究方法
采用超高效液相色谱建立目标甾体激素的分离条件,研究流动相组成及流速、梯度洗脱对分离效果及灵敏度的影响;以二级串联质谱为检测器,选取优化毛细管电压、锥孔电压、碰撞能等质谱参数;建立目标化合物的快速、灵敏、准确的检测方法。
利用固相萃取方法研究目标化合物的萃取、富集和净化方法,优化洗脱液种类和体积、淋洗液类型、水样pH等固相萃取条件,进行加标回收实验,验证前处理方法的可靠性,从而建立有效的样品前处理方法。
运用建立的SPE-UPLC-MS/MS分析方法,对南京市不同点位的水体进行取样分析目标甾体激素的残留状况。
四、文献综述
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