深海微生物的分离与鉴定文献综述

 2022-12-23 05:12

开题报告内容：

一、研究目的及意义

海洋占据地球70.9％的表面积，占有地球总水体的97.0％ 左右，是地球上最重要的生态系统之一。海洋微生物资源丰富多样，具有陆栖微生物可发酵、无限再生、无需过度开采野生资源等优势，同时又具有较陆栖微生物耐热、耐盐、耐酸碱等特性[1]。自半世纪前首次从海洋真菌中发现抗生素头孢菌素后，人们逐渐认识到，海洋微生物不仅是发掘微生物新种，而且也是挖掘具有特殊结构的生物活性物质和研发新药的重要资源[2]。海洋中的微生物提供地球近一半的初级生产力, 影响气候变化，参与物质和能量循环，这些微生物对地球物质循环、生态平衡和人类健康具有十分重要的作用，并且为现代工业生产提供了重要的药物资源和酶资源，因此对海洋微生物资源的开发及研究具有重要意义。

我国海洋微生物资源研究目前还存在着一些限制因素，海洋微生物资源研究力量相对薄弱，且在深海微生物分离方法的研究上缺乏原始创新。海洋中绝大多数微生物尚不能用现有的培养方法和技术进行分离培养，这些微生物被称为未培养微生物（uncultured microorganisms）[3]，这极大地限制了海洋环境中微生物资源的复苏、培养和挖掘。因此本次研究的主要目的是：建立有效的分离培养方法；研究和认识微生物生物学特性和生态学功能；采用分子生物学结合形态学的方法对分离保存的海洋微生物进行物种的分类鉴定和多样性分析。

二、研究方法

富集培养法：根据微生物的特征，在培养基中添加微生生物生长所需的营养成分，有效的富集特定微生物类群[4]。

纯培养法：包括稀释平板法、涂布平板法、平板划线法等。通过纯培养，可得到大量纯种菌体，能够使研究人员很好的了解微生物细胞形态结构、生理生化和遗传特性。

16S rDNA 寡核苷酸分析法：结合菌株的生长特性和形态观察，通过对细菌的 16S rDNA 片段的 PCR 扩增、测序，Blast 序列比对分析(Genbank 网站)等分子生物学方法，对分离出的海洋微生物进行分类鉴定[5]。

夹心平板技术：夹心培养基共分为上、中、下三层；下层为实验室常用的2216E培养基，上层为改良的2216E培养基，中间用可培养细菌作为夹心菌株[6]。

三、研究内容

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