开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、拟研究问题
本课题以百部生物碱为研究对象,针对肺损伤的病理机制,初步探索百部生物碱对药物诱导小鼠肺部损伤的保护作用及其机制。
二、研究手段
(1)小鼠气管给药造模;
小鼠腹腔注射10 ml/kg,4%的水合氯醛进行麻醉,小鼠麻醉后,固定,消毒小鼠颈部。用剪刀纵向剪开小鼠颈部皮肤,用镊子纵向钝性撕开筋膜与肌肉,暴露气管。注射器刺入气管注入药物。然后迅速将鼠板直立,旋转鼠板,观察小鼠呼吸情况,旋转后用75%酒精棉消毒颈部伤口,缝合,并在缝合处滴1-2滴青霉素注射液。将术后小鼠放回干燥洁净的鼠笼休息,待苏醒后正常饲养。
(2)免疫组化或免疫荧光检测小鼠肺组织中相关生化指标;
(3)百部生物碱对药物诱导巨噬细胞损伤的保护作用;
(4)Western blot及Elisa试剂盒检测相关蛋白表达的变化。
本实验以百部生物碱对小鼠肺损伤的保护作用进行研究,首先经气管给药以药物诱导小鼠肺部损伤制造模型,于造模后第8至21天给药,最后麻醉处死。处死后取出小鼠肺组织做组织病理切片,测相关生化指标及蛋白表达变化。体外试验以药物诱导的巨噬细胞损伤为模型,研究百部生物碱的保护作用。
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