开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题研究或解决的问题
前列腺癌是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果，是男性最常见的恶性肿瘤。在美国男性中，前列腺癌是造成非皮肤性癌症最主要的原因。在亚洲，其发病率低于西方国家，但近年来呈迅速上升趋势。肿瘤的免疫治疗近年来发展很快， 肿瘤疫苗是利用肿瘤细胞或肿瘤抗原物质诱导机体的特异性细胞免疫和体液免疫反应，以调节机体免疫功能，达到治疗肿瘤的目的。
树突状细胞是目前公认的最强的专职抗原递呈细胞，诱导和调节CD4 ，CD8 T细胞，在抗肿瘤免疫中起到至关重要的作用。成熟DC可以诱导免疫系统产生包括CD4 Th1反应和CD8 细胞毒反应在内的细胞免疫反应。而且负载抗原的成熟DC在诱导肿瘤凋亡起着关键的作用。以肿瘤细胞裂解物致敏的DC作为脑癌疫苗已在瑞士成功上市，另外一种治疗前列腺癌的DC疫苗已被FDA批准。
将来源于微生物热休克蛋白70(microbial hot shock protein 70，mHSP70)第407-426的一段20个氨基酸的序列两次重复(2mHSP70407～426，M2)，研究表明M2不仅可以诱导有效抗肿瘤的Th1(T helper 1)类诸如白介素-12(IL-12)，肿瘤坏死因子alpha;(TNF-alpha;)和干扰素gamma;(IFN-gamma;)等细胞因子的分泌，也可以有效的刺激DC成熟。
本课题以小鼠前列腺癌RM-1移植瘤作为模型，使用转染M2且RM-1全细胞裂解物致敏的DC疫苗，以考察内源性表达的M2能否增强DC的抗肿瘤免疫治疗效果以及其诱导的细胞免疫反应。
二、研究方法和技术路线
2.1 构建GFP-M2
2.1.1 从pcDNA3.1 -GFP中扩增出目的片段GFP
2.1.2 通过PCR四次加端将M2连接在GFP末端
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