一、课题解决的问题
肺炎支原体(M.Pneumonia)是人类支原体肺炎的病原体。支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主，有时并发支气管肺炎，称为原发性非典型性肺炎。主要经飞沫传染，潜伏期2~3周，发病率以青少年最高。临床症状较轻，甚至根本无症状，若有也只是头痛、咽痛、发热、咳嗽等一般的呼吸道症状，但也有个别死亡报道。一年四季均可发生，但多在秋冬时节。因此，对MP抗原的检测和后续疫苗的研发对人类健康有重大的意义。
P1蛋白是一种密合性很高的膜表面蛋白。它位于MP的顶部，对于胰蛋白酶非常敏感。其相对分子质量为约1.710 ^ 5，可刺激机体产生强烈的免疫应答。Rama Chaudhry发现,在P1的COOH端含有大量的脯氨酸,且与MP-IgG抗体阳性患者的血清呈明显的正相关性。因为人肺炎支原体的P1C蛋白具有较好的抗原性和特异性，所以进一步改进之后可用于临床检测，为进一步研制开发新型诊断试剂和治疗方法提供了有价值的理论和实验依据。
本实验拟设计采用液体培养基扩大培养的方式来快速制备人肺炎支原体P1C蛋白。并通过破碎、离心、透析等手段，对目的蛋白进行纯化。旨在通过基因工程的方式,利用原核表达载体表达P1C重组抗原,获得大量的纯化蛋白,为后续的MPP免疫学研究和疫苗的制作奠定基础。
二、研究方法和技术路线
1.1质粒的提取
1、穿刺菌培养
2、获取菌体沉淀
3、裂解细菌DNA
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