1、拟研究或解决的问题CD24是一类信号传导分子，在多种实体瘤中高表达，尤以卵巢癌、乳腺癌最甚，以CD24为新的免疫检查点是当前的研究热点，靶向人CD24的单克隆抗体也被证明具有良好的治疗潜力；NO是机体内一类重要的信使物质和效应分子，参与人体内血管调节、炎症发生和免疫反应等过程，目前临床上已研发出一些NO供体药物，且具有良好的抗肿瘤活性。
本课题将靶向人CD24的单克隆抗体与一氧化氮供体进行定点偶联，在第一代HN-01的基础上制备出HN-02，通过一些实验对其进行鉴定并在构建好的体外肿瘤模型中探究其抗肿瘤活性。
2、采用的研究手段（1）将靶向人CD24的定点突变抗体TG7质粒瞬时转染到HEK 293细胞中表达。
（2）protein A亲和层析纯化、超滤浓缩抗体，非还原SDS-PAGE进行初步鉴定其分子量，BCA测定浓度。
（3）HIC-HPLC鉴定HN-02的纯度以及通过计算峰面积来测定HN-02的平均药物偶联比DAR。
（4）将HN-02加入孵育的肿瘤细胞中，Griess试剂、流式检测细胞内外HN-02释放NO情况。
（5）荧光标记HN-02，流式细胞仪检测CD24抗原介导的HN-02的内吞效率。
3、文献综述随着PD-1、PD-L1为代表的肿瘤免疫疗法的问世，掀开了人类历史上抗击肿瘤的新篇章，为癌症治疗开拓了一个全新的治疗思路。
除了PD-1、PD-L1以外，免疫检查点CD24也是现在临床和科研的热点。
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