课题名称 基因工程菌发酵工艺的优化与稳定课题性质 基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究 本课题主要需研究的问题有: 一、培养基的配料形式对发酵罐发酵初期工程菌的适应期长短的影响 理论支持:同一菌种在不同培养基中的代谢途径和代谢进程存在差异,代谢过程中的相关酶(尤其是诱导酶)亦存在不同之处。
主要问题:菌体在摇瓶培养复壮阶段与发酵罐罐内培养阶段培养基主要成分差异太大,这种差异可能导致菌体在代谢途径方面和诱导酶的合成方面花费较长时间作出调整,从而加长了适应期的时长。
针对上述问题,我研究小组决定做对照试验。
具体试验安排如下:A组: a、菌株复壮阶段:一、二、三级种子培养基使用YPD(酵母粉1%、蛋白胨2%、葡萄糖1%)培养基;b、罐内培养阶段:使用BSM基础培养基 YNBB组: a、菌株复壮阶段:一、二、三级种子培养基使用YPD(酵母粉1%、蛋白胨2%、葡萄糖1%)培养基; b、罐内培养阶段:使用BSM基础培养基 YNB YPG营养培养基预期结果: A组适应期与B组适应期相同 表明:移种过程中如果培养基差异太大,不影响微生物发酵培养过程中的适应期的时长。
b、A组适应期较B组适应期短 表明:移种过程中如果培养基差异太大,可缩短微生物发酵培养过程中的适应期的时长。
c、A组适应期较B组适应期长 表明:移种过程中如果培养基差异太大,会延长微生物发酵培养过程中的适应期的时长。
二、甘油的补料时机及补加策略对菌体生长、繁殖速度的影响 理论支持:1、碳源对微生物生长代谢的作用主要提供细胞的碳架,提供细胞生命活动所需的能量,提供合成产物的碳架。
2、底物浓度过高会产生底物抑制作用,从而减缓菌体的生长于繁殖。
3、甘油在菌体内的积累会产生乙醇、乙酸等物质,该类物质对外源基因的表达起到抑制作用。
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